假病毒中和实验——荧光素酶报告基因法测定中和抗体滴度标准流程
一、原理中和抗体挡住病毒进入细胞，是评估感染免疫和疫苗效果的关键指标。活病毒中和实验（PRNT）要在 BSL-3 里做，周期长，判读靠人眼数噬斑。假病毒法换个思路。把目标病毒的刺突糖蛋白（S 蛋白）装配到复制缺陷的骨架病毒上。骨架里塞一个荧...
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抗原原罪
抗原原罪说的是一个反直觉的免疫现象：当一个人先后接触过两种抗原性相近但又不完全相同的病毒毒株时，他的免疫系统倾向于优先复用第一次感染或接种时建立的抗体和记忆细胞：哪怕这些"旧工具"对付新毒株的效率已经打了折扣。这个词是1...
Western blot病毒蛋白免疫印迹——特异性抗体确证实验
原理Western blot是分子量分辨率最高的蛋白检测方法。病毒裂解液经SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳）按分子量分离蛋白——小蛋白迁移快、大蛋白迁移慢。电泳后电转至PVDF膜，经封闭、一抗（抗病毒蛋白，如抗N蛋白单抗）...
病毒中和实验——微量中和法测定中和抗体滴度
原理中和实验直接测定血清中抗体的生物功能——阻断病毒进入宿主细胞的能力。血清经56℃ 30 min热灭活去除补体活性后，从1:10起做2倍系列稀释。每稀释度与固定剂量病毒（通常100 TCID50）混合，37℃孵育1 h让抗体充分中和。混合...
ELISA间接法——病毒特异性IgG/IgM抗体检测标准操作
原理ELISA间接法是最经典的抗体检测模式。病毒抗原预先固定于96孔板底表面（物理吸附），加入待检血清孵育——特异性抗病毒抗体（一抗）与抗原结合。洗涤去除未结合成分后加入酶标二抗（如辣根过氧化物酶标记的抗人IgG），再次洗涤后加TMB（四甲...